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貨號:R4118
英文名稱(chēng):Hotstart Taq DNA Polymerase
其他名稱(chēng):Hotstart Taq DNA聚合酶
分子量:94kDa,單體
級別:BR
純度:≥99%
濃度:5u/ul
活性定義:在74℃、30分鐘內,使10nmol脫氧核糖核酸合成滲入多聚核苷酸(吸附在DE-81上)所需的酶量
酶活性分析混合物:25mM TAPS(PH9.3,25℃), 50mM KC1, 2mM MgCL2, 0.2mM各種dATP,dGTP,dTTP, 0.1mM dCTP, 0.75mM活化的鮭魚(yú)精DNA和0.4MBq/ML(3H).-dTTP
保存緩沖液組分:20mM Tris-HCL(PH9.0), 1mM DTT, 0.1mM EDTA,100mM KC1, 0.5%(V/V) Tween 20,0.5%(v/v) Nonidet P40和50%(v/v)甘油
10×Hot start PCR Buffer:200mM Tris-HCL(PH8.3,25℃), 200mM KC1, 50mM (NH4)2SO4
抑制劑:陰離子去污劑(脫氧膽酸、肌氨酰和SDS的濃度分別高于0.06、0.02和0.01%時(shí))
失活:酚/氯仿抽提
質(zhì)量控制:相關(guān)測試表明無(wú)內切或外切脫氧核糖核酸酶、核糖核酸酶污染
功能啟動(dòng):熱啟動(dòng)PCR
性狀:液體。設計用于增強DNA擴增的特異性、敏感性和產(chǎn)量。使用該酶可在室溫配制反應體系,使用方便。它是一種化學(xué)修飾的重組Taq DNA Polymerase,蛋白分子氨基酸殘基上增加了熱不穩定的封閉基團。該酶在室溫下沒(méi)有活性,避免形成引物二聚體和非特異性延伸,從而增加DNA擴增的特異性。95℃加熱4分鐘可恢復活性?;罨拿妇哂信cTaq DNA Polymerase相同的功能:催化5——3方向合成DNA,無(wú)可檢測的3——5校正外切酶活性,具有較低的5——3外切酶活性。該酶還具有脫氧核糖核酸酶轉移活性,在PCR產(chǎn)物的3-端多加11個(gè)腺嘌呤,活化前檢測不到這些活性。
用途:生化研究。高產(chǎn)量擴增復雜模板;PCR特異性高-降低錯配效應和減少引物二聚體的生成;增強的PCR敏感性;使用方便,室溫配制PCR反應體系;擴增產(chǎn)物具有3-dA突出末端;熱啟動(dòng)PCR;高產(chǎn)量擴增長(cháng)達3kb片段;RT-PCR;特異性擴增復雜cDNA和基因組模板;擴增低拷貝DNA模板;實(shí)時(shí)PCR;多重PCR;制備TA克隆用PCR產(chǎn)物
保存:-20℃,保質(zhì)期1年